Người Nhện 2 kể về Peter Parker (Tobey Maguire) trở nên thật khó khăn sau khi anh có những năng lực đặc biệt của loài nhện. Peter luôn phải cố gắng diễn tốt cả hai vai Siêu nhân và một sinh viên đại học bình thường. Mọi chuyện trở nên rắc rối hơn khi anh quyết định gạt bỏ mọi chuyện để thổ lộ tình yêu với Mary Jane Watson (Kirsten Dunst). Trong khi đó, Mary Jane đã bước chân vào nghệ thuật với những vai diễn trong nhà hát. Đồng thời cô cũng hẹn hò với một chàng trai khác khiến cơ hội của Peter dường như rất mong manh. Tệ hơn nữa người bạn thân của Peter là Harry Osborn nuôi dưỡng mối thâm thù với Người nhện – kẻ đã giết cha anh ta Norman Osborn. Tất cả những điều này khiến Peter khao khát một cuộc sống bình thường hơn bao giờ hết.